光场显微镜 (Light Field Microscope)

光场 (Light Field)

光场显微镜 (Light Field Microscope)是Wen Lab的鱼组为研究斑马鱼而亲手做的仪器。

光场 (Light Field)这词,和电场(Electric Field)、磁场(Magnetic Field)很容易混淆。

电场和磁场无非是$\vec{E}(\vec{r},t)$, $\vec{B}(\vec{r},t)$,两个从$R^4$到$R^3$的映射(map)而已。

光、电磁波,从波动光学/经典场论/经典电动力学的角度看,都是由$\vec{E}(\vec{r},t)$和$\vec{B}(\vec{r},t)$组成的东西而已。(PS:由于麦克斯韦电方程组施加了约束,不需要6个独立分量,只需要4个,就可以确定一个电磁波)

但是,对于拍摄细胞团、神经系统而言,这样有些复杂了,因为我们通常不需要考虑衍射。我们打出去的光不是相干光,我们要拍的东西也没有到衍射极限(人类的红细胞直径大约为6000-8000 nm)。于是,我们用几何光学就可以。

几何光学中,光线依然符合叠加原理和独立传播原理,于是乎,我们可以用下面的5元函数表示在某一点的光的性质
$$
L(x,y,z,\theta,\phi)
$$
这个5元函数就被称为光场(Light Field)!

当然,你也可以在其中加入更多的信息
$$
L(x,y,z,\theta,\phi,t,\lambda,\psi)
$$
Where $\psi$ stands for the polarization angle.

光场显微镜 (Light Field Microscope)

能捕捉每一点的光场的显微镜就被称为光场显微镜 (Light Field Microscope)

光场显微镜的原理如图:

通过从不同角度拍摄,可以重构出三维信息。所谓的重构,和初中和高中玩的三视图其实是一模一样的东西啦。

通常,拍下来的二维图片,称之为frame;重构后的三维东西,称之为volume。

Wen Lab

鱼组的光场显微镜,每秒能拍100个volume,每个volume包含27个frame。即,frame per second = 2700。

聪明的你应该已经意识到了,我们有27个相机,从不同的角度拍摄。

具体地说,27个相机分成2组,1组13个,1组14个,两组在z轴上有2个焦点,每组的焦平面绕焦点转动。即,换句话说,在焦点1,13个相机从不同的角度拍,在焦点2,另外14个相机从不同的角度拍。

最后,鱼组得到了重构后的体帧。体帧,说白了就是,600·600·300个小正方体。

可视化

得到每一个体帧之后,如何进行可视化呢?要知道,可视化三维的东西是很难的,我们总不能为了这个专门编写一个3D游戏吧。

一种方法是,采用三视图来表示一个体帧。即,用3个二维平面帧来表示1个三维体帧。

那么用哪个平面作为代表呢?

鱼组采用了所谓的Max Intensity Projection,即,对每个体帧,算出其在x, y, z三个方向上的亮度最大的平面帧,作为代表。

当然,也可以用Mean Intensity Projection或Medium Intensity Projection。

数据分析